Donkey çiftleştirme, bir erkek eşek (jack) ile bir dişi eşeğin (jenny) çiftleşmesi yoluyla yapılır. Çiftleştirme süreci şu şekilde gerçekleşir: Estrus dönemi: Jenny, üreme dönemine girdiğinde (estrus veya "ısı" dönemi) hormonları, jack'lerin ilgisini çeker. Davranışsal işaretler: Jenny, sık idrara çıkma ve kendini erkeğe sunma gibi davranışlarla çiftleşmeye hazır olduğunu gösterir. Çiftleşme: Jack, jenny'ye yaklaşır, onun genital bölgesini koklar ve eğer jenny çiftleşmeye hazırsa, jack ona monte olur. Başarılı bir çiftleştirme için: Jack'in normal sperm sayısına ve iyi kaliteli sperme sahip olması, herhangi bir cinsel yolla bulaşan hastalıktan arınmış olması gerekir. Jenny'nin üreme anormallikleri olmaması ve herhangi bir bulaşıcı hastalıktan arınmış olması gerekir. Donkey çiftleştirme süreci, agresif davranışlar içerebileceğinden, uygun önlemlerin alınması gereklidir.