Periferik Kan Mononükleer Hücreleri (PBMC) izolasyonu için aşağıdaki adımlar izlenir: 1. Numune Hazırlığı: Kan örneği, EDTA içermeyen bir tüpte alınmalı ve hemen işleme konulmalıdır. 2. Santrifüj: Düşük hızlı (300-400 × g) ve 20-30 dakika süreli bir santrifüj işlemi yapılır. 3. Density Gradient Ortamı: Ficoll-Paque gibi bir density gradient ortamı kullanılır. 4. PBMC Katmanının Ayrılması: Santrifüj sonrası, plazma ve eritrositlerin altında kalan PBMC katmanı dikkatlice pipet ile alınır. 5. Yıkama ve Resüspansiyon: PBMC katmanı, kalan density gradient ortamı ve plazma proteinlerinden arındırmak için birkaç kez yıkanır ve uygun bir tampon çözelti ile yeniden süspanse edilir. 6. Kalite Kontrolü: İzole edilen hücrelerin canlılığı ve saflığı, flow sitometri veya Trypan blue gibi yöntemlerle kontrol edilir. Bu işlem, özel ekipman ve reaktifler gerektirir, bu nedenle laboratuvar koşullarında deneyimli personel tarafından yapılmalıdır.