Amerikan çizgi filmleri, çeşitli temalar ve hikayeler işler: Toplumsal Eleştiri: "Simpsonlar" gibi diziler, Amerikan kültürünü, televizyonunu, toplumunu ve farklı insanlık hallerini eleştirir. Macera ve Aksiyon: "Batman: Animasyon Serisi" ve "Rick and Morty" gibi yapımlar, macera ve aksiyon dolu hikayeler sunar. Fantezi ve Hayal Gücü: "Avatar: Son Hava Bükücü" ve "Samuray Jack" gibi çizgi filmler, fantastik ve hayal ürünü dünyalarda geçen maceraları işler. Günlük Hayat: "Archer" ve "Jetgiller" gibi yapımlar, karakterlerin günlük hayatlarını ve yaşadıkları maceraları anlatır. Komedi ve Eğlence: "Looney Tunes" ve "Pembe Panter" gibi diziler, komik ve absürt maceralarla izleyicileri eğlendirir. Ayrıca, bazı Amerikan çizgi filmleri propaganda amaçlı da kullanılmıştır; örneğin, "Der Fuehrer's Face" adlı Disney yapımı, Nazi Almanyası'nda geçen ve Donald Duck'ın bir fabrikada zor şartlarda çalışmasını konu alan bir propaganda çizgi filmidir.