MTT yöntemi ile hücre canlılığı, hücrelerin metabolik aktivitesine dayanarak ölçülür. Bu yöntem şu adımlarla gerçekleştirilir: 1. Hücrelerin Hazırlanması: Hücreler uygun koşullarda kültürlenir ve %70-80 konfluente ulaşması sağlanır. 2. Hücrelerin Sayılması ve Dökülmesi: Kültürden uygun sayıda hücre alınarak 96 delikli plakaya dökülür (her delikte 1.000-10.000 hücre). 3. Tedavi Uygulaması: Hücreler farklı koşullara (ilaç, toksin vb.) tabi tutulur, kontrol grubu ise tedavi uygulanmadan bırakılır. 4. MTT Çözeltisinin Eklenmesi: Tedavi süresinin ardından (genellikle 24-72 saat sonra), her bir delik için MTT çözeltisinden belirli bir miktar eklenir (genellikle 10 µl). 5. İnkübasyon: Plaka, 37°C’de 2-4 saat inkübe edilir. 6. Formazan Kristallerinin Çözünmesi: İnkübasyon süresi sonunda, her bir delikte oluşan formazan kristallerini çözmek için 100 µl DMSO eklenir ve mikrotiter plaka iyice karıştırılır. 7. Spektrofotometrik Ölçüm: DMSO ile çözülen formazan çözeltisinin absorbansı, 570 nm dalga boyunda spektrofotometre ile ölçülür. 8. Verilerin Analizi: Elde edilen absorbans değerleri, hücre canlılığını belirlemek için kullanılır.