Buradasın
Sanger sekanslamada kalite kontrolü nasıl yapılır?
Yazeka
Arama sonuçlarına göre oluşturuldu
Sanger sekanslamada kalite kontrolü birkaç yöntemle yapılır:
- Peak Şeklinin Değerlendirilmesi: İdeal zirveler keskin, simetrik ve iyi tanımlanmış olmalıdır 1. Geniş veya misshapen zirveler, potansiyel sorunları işaret eder 1.
- Peak Aralığının Analizi: Kaliteli bir kromatogramda zirveler genellikle eşit aralıklarla yer alır 1. Sıkıştırılmış veya düzensiz aralıklar, sekanslama artefaktlarını veya elektroforez sürecindeki problemleri gösterebilir 1.
- Dye Blob ve Primer Dimeri Kontrolü: Dye blobs (boya blobları) ve primer dimerleri gibi yaygın artefaktlar, sekanslama reaksiyonunun optimize edilmesiyle azaltılabilir 14. Bu artefaktlar, kromatogramda geniş ve alışılmadık şekilli zirveler olarak görünür 1.
- Jel Elektroforezi: PCR ürünlerinin amplifiye olup olmadığını anlamak için agaroz jel elektroforezi yapılır ve sonuçlar jel görüntüleme sistemi ile değerlendirilir 3.
- Yazılım Kullanımı: Sekanslama sonrası, her bir zirvenin kalitesini puanlayan ve düşük kaliteli temel zirveleri kaldıran yazılım programları kullanılır 25.
5 kaynaktan alınan bilgiyle göre: