• Buradasın

    Real-time PCR'da hangi plaklar kullanılır?

    Yazeka

    Arama sonuçlarına göre oluşturuldu

    Real-time PCR'da 96-well veya 384-well formatına sahip özel mikroplaklar kullanılır 3. Bu plaklara qPCR plakaları da denir 4.
    Bu plakların yanı sıra, PCR tüpleri de real-time PCR için kullanılabilir, ancak daha çok küçük ölçekli deneyler veya daha az sayıda numunenin analiz edildiği durumlarda tercih edilir 3.
    5 kaynaktan alınan bilgiyle göre:

    Konuyla ilgili materyaller

    PCR'da hangi enzimler kullanılır?

    PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu) yönteminde DNA polimeraz enzimleri kullanılır. En yaygın olarak kullanılan DNA polimeraz, Taq DNA polimeraz'dır ve bu enzim, Thermus aquaticus bakterisinden elde edilir.

    Real time PCR stripleri ve plakaları nelerdir?

    Real-time PCR şeritleri ve plakaları, kantitatif PCR (qPCR) deneylerinde kullanılan özel mikroplaklardır. Özellikleri: - Format: Genellikle 96-well veya 384-well. - Malzeme: Yüksek kaliteli, termal iletkenliği optimal ve buharlaşmayı minimize eden malzemelerden yapılır. - Kullanım amacı: Reaksiyonların gerçek zamanlı izlenmesini sağlar, DNA amplifikasyonunun başlangıç miktarını kesin olarak ölçmeye olanak tanır. Farkları: - PCR tüpleri daha küçük ölçekli deneyler veya az sayıda örnek için kullanılırken, PCR plakaları yüksek throughput uygulamaları için tercih edilir.

    Realtime PCR nasıl çalışır?

    Real-time PCR (gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu), PCR (polimeraz zincir reaksiyonu) tekniğinin bir varyasyonudur ve DNA veya RNA'nın miktarını ölçmek için kullanılır. Çalışma prensibi: 1. Denatürasyon: Yüksek sıcaklıkta DNA çift sarmalı ayrılarak tek sarmallı hale getirilir. 2. Annealing (bağlanma): Primerler, ayrılmış DNA zincirlerine tamamlayıcı sekanslarıyla hibritleşir. 3. Primer uzaması: DNA polimeraz enzimi (Taq DNA polymerase) ile primerlerin uzatılması sağlanır. Real-time PCR'da bu adımlar, her döngüde PCR ürününün miktarı ölçülerek gerçek zamanlı olarak takip edilir.

    RT-qPCR ne için kullanılır?

    RT-qPCR (quantitative reverse transcription PCR), çeşitli alanlarda kullanılan bir laboratuvar tekniğidir: Gen ifadesi seviyesinin ölçülmesi. RNA parazitinin (RNAi) doğrulanması. Patojenlerin tespiti. Genetik olarak değiştirilmiş organizmaların (GMO) tespiti. Ayrıca RT-qPCR, ilaç discovery ve kanser fenotiplemesi gibi alanlarda da yaygın olarak uygulanmaktadır.

    RT qPCR'da hangi yöntem kullanılır?

    RT-qPCR'da iki yöntem kullanılır: bir-adım (one-step) ve iki-adım (two-step) yöntemi. Bir-adım yönteminde, ters transkripsiyon (RT) reaksiyonu ve qPCR amplifikasyonu aynı tüpte ve tamponda gerçekleştirilir. İki-adım yönteminde ise, RT reaksiyonu ayrı olarak yapılır ve elde edilen cDNA, qPCR için yeni bir tüpe aktarılır.