Buradasın
Vibrio cholerae primer tasarımı nasıl yapılır?
Yazeka
Arama sonuçlarına göre oluşturuldu
Vibrio cholerae için primer tasarımı, karşılaştırmalı genomik ve bioinformatik analiz kullanılarak yapılır 12. İşte genel adımlar:
- Genlerin Taranması: Vibrio cholerae'ye özgü genler, NCBI veritabanındaki referans dizilerle karşılaştırılarak seçilir 12. Bu aşamada, Temel Yerel Hizalama Arama Aracı (BLAST) gibi programlar kullanılır 1.
- Primer Tasarımı: Seçilen genlere özgü primerlerin tasarımı, erime sıcaklığı (Tm), PCR ürün boyutu ve hedef genlerdeki korunmuş (veya değişken) bölgeler gibi kriterlere göre yapılır 1.
- Özgüllük Testi: Tasarlanan primerlerin özgüllüğü, Vibrio cholerae ve diğer bakteri türlerinin DNA'sı üzerinde tek başına PCR yapılarak doğrulanır 1. Primerlerin beklenen PCR sonuçlarını verdiğinden emin olmak için, amplifiye edilen ürünlerin sekansı, orijinal hedef gen sekansı ile karşılaştırılır 1.
- QPCR Kiti: Alternatif olarak, Vibrio cholerae'nin in vitro kantitasyonu için, 100% homoloji sunan ve NCBI veritabanının %95'inden fazla referans dizisiyle uyumlu primerler içeren QPCR kitleri de kullanılabilir 24.
5 kaynaktan alınan bilgiyle göre: