Enzimin çalışma hızı, aşağıdaki faktörlere bağlıdır: 1. Enzim Konsantrasyonu: Enzim miktarı arttıkça reaksiyon hızı da artar. 2. Substrat Konsantrasyonu: Substrat konsantrasyonu, belirli bir değere kadar reaksiyon hızını artırır, sonra sabit kalır. 3. Sıcaklık: Enzimler, belirli bir sıcaklık aralığında en iyi şekilde çalışır. 4. pH Değeri: Her enzimin optimum bir pH aralığı vardır. 5. Su Miktarı: Enzimler, %15'in altında su bulunan ortamlarda çalışmaz. 6. Aktivatör ve İnhibitör Maddeler: Bazı maddeler enzimlerin etkinliğini artırır (aktivatör), bazıları ise durdurur (inhibitör).