D3 vitamini (kolekalsiferol) vücutta şu şekilde sentezlenir: 1. Güneş ışığı: D3 vitamini, ciltte bulunan 7-dehidrokolesterolün ultraviyole B (UVB) güneş ışınlarına maruz kalmasıyla provitamin D3'e dönüşür. 2. Isı etkisi: Provitamin D3, ısı etkisiyle vitamin D3 öncülü olan previtamin D3'e dönüşür. 3. Karaciğer ve böbrek: Ciltte sentezlenen D3 vitamini, karaciğerde 25 hidroksilaz enzimi ile kalsidiole, ardından böbreklerde 1α-hidroksilaz ile biyolojik olarak aktif form olan kalsitriole dönüşür. D3 vitamini ayrıca hayvansal kaynaklardan (balık, karaciğer, süt ürünleri, yumurta) alınabilir.