İmzaya karşı itirazda ispat yükü, senedin elinde olup, takibe başlayan ve imzanın borçluya ait olduğunu iddia eden alacaklıya aittir. Alacaklı, senet altındaki imzanın borçluya ait olduğunu açık ve kesin biçimde ortaya koymalıdır. İcra ve İflas Kanunu'nun 168/5. maddesine göre, borçlunun, borçlu olmadığını veya borcun itfa edildiğini, mehil verildiğini, alacağın zamanaşımına uğradığını, imzaya itirazını ve takibin müstenidi olan senedin kambiyo senedi vasfına haiz olmadığına yönelik şikayetini yasal 5 günlük süre içerisinde icra mahkemesine yapması zorunludur.