Ana arının çiftleştiği, çiftleşme uçuşuna çıkması ve kovana döndükten sonra yumurtlamaya başlamasıyla anlaşılır. Çiftleşme süreci şu adımlarla gerçekleşir: 1. Feromon Salgısı: Ana arı, çiftleşme uçuşuna çıkmadan önce kovan içerisine feromon adı verilen bir koku salgılar. 2. Erkek Arıların Toplanması: Bu kokuyu alan erkek arılar, ana arıyla birlikte kovandan dışarı çıkarlar. 3. Çiftleşme: Çiftleşme, havada ve genellikle 3-4 saat süren bir süreçte gerçekleşir. 4. Spermin Depolanması: Çiftleşme sonrasında ana arı, vajinasında kalan erkek arının üreme organıyla kovana geri döner. 5. Sperm Kesesinin Dolması: Ana arı, sperm kesesini doldurana kadar çiftleşme uçuşuna devam eder ve bu kese 5,3-5,7 milyon sperm alabilir.