"Scoob!" filminde ana karakterler olarak Scooby-Doo, Shaggy Rogers, Fred Jones, Daphne Blake ve Velma Dinkley yer almaktadır. Diğer karakterler arasında ise Dick Dastardly, Blue Falcon, Captain Caveman, Dee Dee Sykes, Dynomutt gibi isimler bulunmaktadır. Toplamda, "Scoob!" filminde ana ve diğer karakterler dahil olmak üzere yaklaşık 30 karakter bulunmaktadır.