Scoob! filminde yer alan karakterler şunlardır: Mystery Inc. Ekibi: Scooby-Doo (Frank Welker). Shaggy Rogers (Will Forte). Fred Jones (Zac Efron). Daphne Blake (Amanda Seyfried). Velma Dinkley (Gina Rodriguez). Diğer Hanna-Barbera Karakterleri: Blue Falcon (Mark Wahlberg). Dick Dastardly (Jason Isaacs). Dee Dee Skyes (Kiersey Clemons). Dynomutt (Ken Jeong). Captain Caveman (Tracy Morgan). Ayrıca, Simon Cowell ve Christina Hendricks gibi konuk karakterler de filmde yer almaktadır.