• Buradasın

    PBMC izolasyonu nasıl yapılır?

    Yazeka

    Arama sonuçlarına göre oluşturuldu

    Periferik Kan Mononükleer Hücreleri (PBMC) izolasyonu için aşağıdaki adımlar izlenir:
    1. Numune Hazırlığı: Kan örneği, EDTA içermeyen bir tüpte alınmalı ve hemen işleme konulmalıdır 12. Numune, oda sıcaklığında (18-22°C) tutulmalı ve sedimantasyonu önlemek için hafifçe karıştırılmalıdır 1.
    2. Santrifüj: Düşük hızlı (300-400 × g) ve 20-30 dakika süreli bir santrifüj işlemi yapılır 12. Bu, kan bileşenlerinin yoğunluğa göre ayrılmasını sağlar 1.
    3. Density Gradient Ortamı: Ficoll-Paque gibi bir density gradient ortamı kullanılır 13. Bu ortam, tüpün dibine eklenir ve üzerine kan örneği katmanlandırılır 3.
    4. PBMC Katmanının Ayrılması: Santrifüj sonrası, plazma ve eritrositlerin altında kalan PBMC katmanı dikkatlice pipet ile alınır 13.
    5. Yıkama ve Resüspansiyon: PBMC katmanı, kalan density gradient ortamı ve plazma proteinlerinden arındırmak için birkaç kez yıkanır ve uygun bir tampon çözelti ile yeniden süspanse edilir 12.
    6. Kalite Kontrolü: İzole edilen hücrelerin canlılığı ve saflığı, flow sitometri veya Trypan blue gibi yöntemlerle kontrol edilir 12.
    Bu işlem, özel ekipman ve reaktifler gerektirir, bu nedenle laboratuvar koşullarında deneyimli personel tarafından yapılmalıdır.
    5 kaynaktan alınan bilgiyle göre:

    Konuyla ilgili materyaller

    Ekstrasyon ve izolasyon nedir?

    Ekstraksiyon ve izolasyon farklı ayırma işlemleridir: 1. Ekstraksiyon: Bir veya daha fazla bileşiğin, orijinal konumlarından (numune veya matris) daha fazla işlem ve analizin yapılacağı fiziksel olarak ayrı bir yere taşınması işlemidir. 2. İzolasyon: Ekstraksiyondan sonra gelen ve saflaştırılmış bir bileşik elde etmeyi amaçlayan ayırma tekniğidir.

    İzolasyonda hangi malzemeler kullanılır?

    İzolasyonda kullanılan bazı temel malzemeler şunlardır: 1. Bitümlü Membran: Çatı kaplama ve temel yalıtımı için yaygın olarak kullanılır, esnek ve su geçirmezdir. 2. Poliüretan İzolasyon: Sprey veya sıvı formunda uygulanır, kuruduktan sonra esnek bir koruyucu katman oluşturur. 3. EPDM Membran: Uzun ömürlü ve esnek bir su yalıtım malzemesidir, yüksek sıcaklıklara ve UV ışınlarına dayanıklıdır. 4. Su Yalıtım Şapı: Zeminlerde su geçirmezlik sağlamak için kullanılır, beton yüzeylerin suya karşı dayanıklı hale gelmesini sağlar. 5. Akrilik Su Yalıtım Malzemesi: Elastik yapısıyla çatlakları kapatır ve suyun yüzeye sızmasını engeller. Ayrıca, cam yünü, taş yünü, polistiren köpük, mantar paneller gibi ısı ve ses yalıtımında kullanılan malzemeler de izolasyonda tercih edilir.

    PBMC ne işe yarar?

    Periferik Kan Mononükleer Hücreleri (PBMC), bağışıklık sisteminin önemli bileşenleridir ve çeşitli araştırma ve klinik uygulamalarda kullanılırlar. PBMC'lerin başlıca kullanım alanları: - Biyomarker analizi: Hastalıkların teşhisinde ve ilerlemesinin izlenmesinde biyomarker olarak kullanılırlar. - İlaç araştırmaları: İlaçların ve xenobiotiklerin insan bağışıklık sistemi üzerindeki etkilerini in-vitro olarak değerlendirmek için kullanılırlar. - Kanser immünoterapisi: CAR-T hücre terapisi gibi kanser tedavilerinde T hücrelerinin kaynağı olarak kullanılırlar. - Vaccine geliştirme: Aşı adaylarının fonksiyonel özelliklerini değerlendirmek için in-vitro kültürde kullanılırlar. - Hematolojik araştırmalar: Lösemi ve diğer kanla ilgili malignitelerin araştırılmasında kullanılırlar.