• Buradasın

    Kromatografi kağıdı nasıl hazırlanır?

    Yazeka

    Arama sonuçlarına göre oluşturuldu

    Kromatografi kağıdı hazırlamak için aşağıdaki adımlar izlenir:
    1. Kromatografi kağıdının hazırlanması:
      • Bir kromatografi kağıdı alınır ve alt kenarından (kâğıt üzerinde sıvının yürüme yönünü gösteren ok yukarı gelecek şekilde) 3 cm yükseklikte bir çizgi kurşun kalemle çizilir 1.
      • Bu çizgi üzerinde örneklerin damlatılacağı yerler 3 cm aralıklarla belirlenir ve her bir standart ve örnek için bir adet olmak üzere 1 cm çaplı daireler çizilir 1.
      • Hazırlama sırasında elin temasıyla oluşacak kirlilikler istenmeyen lekeler oluşturacağı için çıplak elle temastan kaçınılmalıdır 1.
    2. Örneklerin uygulanması:
      • Kağıt üzerinde çizilen 1 cm çaplı dairelerin merkezine, daireyi aşmayacak şekilde 10 μL aminoasit standart çözeltisi veya örnek (serum, idrar vb.) yavaş yavaş, gerekirse kurutularak damlatılır 1.
      • Hangi noktaya hangi standardın ve örneğin konulduğu not edilmelidir 1.
    3. Yürütme işlemi:
      • Standart ve örnekler uygulandıktan sonra kağıt rulo şekline getirilerek içerisinde yüksekliği 1,5 cm kadar olan yürütücü sıvının (butanol-asetikasit-su karışımı) bulunduğu kapaklı kromatografi tanklarına yerleştirilir 1.
      • Yürütücü sıvı kağıdın boyunu aşmayacak şekilde kağıt tankta 6-18 saat bekletilir 1.
    4. Değerlendirme:
      • Kromatografi tankından çıkarılan kağıt düz bir zemine yayılarak uygun bir boya (genellikle ninhidrin) ile boyanır 1.
      • Kağıt üzerinde ortaya çıkan aminoasidlere ait lekeler iki şekilde değerlendirilir:
        • Kalitatif değerlendirme: Maddelerin kromatografi esnasında belirli koşullarda katettikleri yol her bir madde için karakteristiktir 1.
        • Kantitatif değerlendirme: Her maddenin hareketli fazla sürüklenmesi farklıdır 5.
    5 kaynaktan alınan bilgiyle göre:

    Konuyla ilgili materyaller

    Kolon kromatografisi kolon nasıl doldurulur?

    Kolon kromatografisinde kolonun doldurulması iki farklı yöntemle yapılabilir: 1. Kuru doldurma: Huni yardımıyla kolon doldurulur, ardından çözücü ilave edilir. 2. Islak doldurma: Çözücü içindeki katı madde süspansiyon halinde eklenir. Kolon doldurma işlemi için genel adımlar: 1. Uygun boyutta bir kolon seçilir. 2. Kolona, konulacak dolgu maddesini akmasını engelleyecek frit adı verilen gözenekleri olan cam bir parça yerleştirilir. 3. Fritin üzerine, sabit faz olarak kullanılacak dolgu maddesi konur. 4. Gerekirse, sabit fazın üzerine kum veya filtre yerleştirilir. Günümüzde kolon dolgu maddesi olarak genellikle silika jel, alümina ve selüloz kullanılır.

    Kromatografide kolon dolgusu neden önemlidir?

    Kromatografide kolon dolgusu (sabit faz) önemlidir çünkü: Ayırma işlemini etkiler. Deney sonuçlarını belirler. Kromatografik yöntemin türünü belirler. Yaygın kolon dolgu maddeleri arasında silika jel, alumina ve selüloz bulunur.

    Kromatografide elüsyon nedir?

    Kromatografide elüsyon, çözünen maddelerin sabit faz üzerinden sürüklenmesi işlemidir. İki tür elüsyon süreci vardır: 1. İzokratik elüsyon: Ayırma boyunca tek bir çözücü veya hareketli faz kullanılır. 2. Gradyan elüsyon: Ayırma işlemi sırasında çözücünün bileşimi değiştirilir. Elüsyon işleminde kullanılan çözücüye elüent adı verilir.

    Gaz ve sıvı kromatografi arasındaki fark nedir?

    Gaz kromatografisi (GC) ve sıvı kromatografisi (LC) arasındaki temel farklar şunlardır: Mobil faz: GC'de mobil faz gazdır (genellikle helyum veya azot), LC'de ise sıvıdır. Analitin kimyası: GC, uçucu veya uçucu hale getirilebilen bileşiklerin analizinde kullanılır; LC ise termal olarak kararsız ve yüksek sıcaklıklarda bozunabilen numuneler için uygundur. Kolon boyutu: Sıvıların daha yüksek yoğunluğu ve viskozitesi nedeniyle, LC kolonlarının genellikle kısa ve geniş olması gerekir; GC'de ise daha dar deliklere sahip daha uzun kolonlar kullanılır. Çalışma sıcaklığı: GC kolonlarının sıcaklığı 450°C'ye kadar çıkabilir, LC'de ise işlemler genellikle ortam sıcaklığında gerçekleştirilir. Çalışma basıncı: LC için yüksek basınç (5000-6000 psi) gerekirken, GC için daha düşük basınçlar (150-200 psi) yeterlidir.

    Kağıt kromatografisinde hangi kağıt kullanılır?

    Kağıt kromatografisinde gözenekli selüloz tabakadan oluşan kağıtlar kullanılır. Bu kağıtlar, fazla miktarda su bağlama özelliğine sahip olduğu için çözücü içindeki su moleküllerini tutar ve bu su, sabit faz olarak görev yapar. Kağıt kromatografisinde kullanılan başlıca kağıt türleri şunlardır: standart kağıtlar; hızlı akış kağıtları; preparatif kağıtlar; karboksil kağıtlar; asetilenmiş kağıtlar; iyon değiştirme kağıtları.

    Kromatografide hangi fazlar kullanılır?

    Kromatografide kullanılan fazlar: Sabit faz. Hareketli faz. Bazı kromatografi türlerinde kullanılan özel fazlar: Gaz-katı kromatografisinde sabit faz, silikajel, alümina gibi adsorbanlardır. Gaz-sıvı kromatografisinde sabit faz, yüksek mol kütleli polimerlerdir. Jel geçirgenlik kromatografisinde sabit faz, gözenekli bir reçinedir.

    Kağıt kromatografisi ve ince tabaka kromatografisi arasındaki fark nedir?

    Kağıt kromatografisi ve ince tabaka kromatografisi (İTK) arasındaki temel farklar şunlardır: Sabit Faz: Kağıt kromatografisinde sabit faz, kağıdın selüloz ağ şebekesine bağlanmış su molekülleridir. Plaka Yapısı: İTK plakaları, genellikle cam, plastik veya metal bir yüzeye adsorbanın kaplanmasıyla elde edilir. Ayırma Hızı: İTK, kağıt kromatografisine göre daha hızlı ayırma sağlar; bu, İTK'da kullanılan adsorbanın daha ince bir tabaka halinde olmasından kaynaklanır. Kullanım Alanı: İTK, kağıt kromatografisine göre daha çeşitli adsorban seçme olanağı sunar ve genellikle daha karmaşık karışımların ayrılması için tercih edilir.