• Buradasın

    Kromatografi kağıdı nasıl hazırlanır?

    Yazeka

    Arama sonuçlarına göre oluşturuldu

    Kromatografi kağıdı hazırlamak için aşağıdaki adımlar izlenir:
    1. Kromatografi kağıdının hazırlanması:
      • Bir kromatografi kağıdı alınır ve alt kenarından (kâğıt üzerinde sıvının yürüme yönünü gösteren ok yukarı gelecek şekilde) 3 cm yükseklikte bir çizgi kurşun kalemle çizilir 1.
      • Bu çizgi üzerinde örneklerin damlatılacağı yerler 3 cm aralıklarla belirlenir ve her bir standart ve örnek için bir adet olmak üzere 1 cm çaplı daireler çizilir 1.
      • Hazırlama sırasında elin temasıyla oluşacak kirlilikler istenmeyen lekeler oluşturacağı için çıplak elle temastan kaçınılmalıdır 1.
    2. Örneklerin uygulanması:
      • Kağıt üzerinde çizilen 1 cm çaplı dairelerin merkezine, daireyi aşmayacak şekilde 10 μL aminoasit standart çözeltisi veya örnek (serum, idrar vb.) yavaş yavaş, gerekirse kurutularak damlatılır 1.
      • Hangi noktaya hangi standardın ve örneğin konulduğu not edilmelidir 1.
    3. Yürütme işlemi:
      • Standart ve örnekler uygulandıktan sonra kağıt rulo şekline getirilerek içerisinde yüksekliği 1,5 cm kadar olan yürütücü sıvının (butanol-asetikasit-su karışımı) bulunduğu kapaklı kromatografi tanklarına yerleştirilir 1.
      • Yürütücü sıvı kağıdın boyunu aşmayacak şekilde kağıt tankta 6-18 saat bekletilir 1.
    4. Değerlendirme:
      • Kromatografi tankından çıkarılan kağıt düz bir zemine yayılarak uygun bir boya (genellikle ninhidrin) ile boyanır 1.
      • Kağıt üzerinde ortaya çıkan aminoasidlere ait lekeler iki şekilde değerlendirilir:
        • Kalitatif değerlendirme: Maddelerin kromatografi esnasında belirli koşullarda katettikleri yol her bir madde için karakteristiktir 1.
        • Kantitatif değerlendirme: Her maddenin hareketli fazla sürüklenmesi farklıdır 5.
    5 kaynaktan alınan bilgiyle göre:

    Konuyla ilgili materyaller

    Kromatografide hangi fazlar kullanılır?

    Kromatografide iki temel faz kullanılır: sabit (durağan) faz ve hareketli (mobil) faz. Sabit faz, üzerinde ayırma işleminin yapıldığı faz olup, moleküller için destek ortamı görevi görür. Hareketli faz, moleküllerin yürümesini sağlayan fazdır ve organik çözücüler gibi çeşitli maddelerden oluşabilir.

    Kromatografide kolon dolgusu neden önemlidir?

    Kromatografide kolon dolgusu (sabit faz) önemlidir çünkü: Ayırma işlemini etkiler. Deney sonuçlarını belirler. Kromatografik yöntemin türünü belirler. Yaygın kolon dolgu maddeleri arasında silika jel, alumina ve selüloz bulunur.

    Kromatografide elüsyon nedir?

    Elüsyon, kromatografide bir kolondan çözücü (hareketli faz) geçirerek çözünmüş bileşenlerin sabit fazdan taşınması veya sökülmesi işlemi olarak tanımlanır.

    Kolon kromatografisi kolon nasıl doldurulur?

    Kolon kromatografisi kolonu doldurmak için iki yöntem vardır: kuru doldurma ve ıslak doldurma. Kuru doldurma yöntemi: 1. Kolonun tepesine yerleştirilen bir huniden kolona toz halinde sabit faz (dolgu maddesi) eklenir. 2. Daha sonra çözücü eklenir. Bu yöntemle homojen bir kolon hazırlanması zordur, çünkü çözücü eklendikten sonra kolona doldurulan dolgu maddesinin tanecikleri arasında hava kabarcıkları oluşur ve kolonun homojenliği bozulur. Islak doldurma yöntemi: 1. Sabit faz, kullanılacak çözücü içinde süspansiyon haline getirilir. 2. Bu süspansiyon iyice karıştırılarak içindeki hava kabarcıkları yok edilir. 3. Kolona yavaş yavaş eklenir. Bu şekilde daha homojen bir kolon hazırlanmış olur.

    Kağıt kromatografisinde hangi kağıt kullanılır?

    Kağıt kromatografisinde gözenekli selüloz tabakadan oluşan kağıtlar kullanılır. Bu kağıtlar, fazla miktarda su bağlama özelliğine sahip olduğu için çözücü içindeki su moleküllerini tutar ve bu su, sabit faz olarak görev yapar. Kağıt kromatografisinde kullanılan başlıca kağıt türleri şunlardır: standart kağıtlar; hızlı akış kağıtları; preparatif kağıtlar; karboksil kağıtlar; asetilenmiş kağıtlar; iyon değiştirme kağıtları.

    Kağıt kromatografisi ve ince tabaka kromatografisi arasındaki fark nedir?

    Kağıt kromatografisi ve ince tabaka kromatografisi (İTK) arasındaki temel farklar şunlardır: 1. Sabit Faz: Kağıt kromatografisinde sabit faz olarak kağıt kullanılırken, İTK'de adsorban maddeler (alumina, silika jel, sellüloz vb.) cam veya plastik plakalar üzerine ince bir tabaka halinde yayılır. 2. Uygulama Şekli: Kağıt kromatografisinde numune ve standart, kromatografi kağıdına tatbik edilir ve hareketli faz (organik çözücü) tankta yürütülür. 3. Ayırma Hızı ve Verimlilik: İTK, daha çeşitli adsorban seçme olanağı sunar ve genellikle daha hızlı ve verimli bir ayırma sağlar (20-40 dakika gibi kısa bir sürede). 4. Görünür Hale Getirme: Kağıt kromatografisinde lekeler, uygun bir boya (genellikle ninhidrin) ile boyanarak görünür hale getirilirken, İTK'de UV ışığı veya özel reaktifler kullanılır.

    Gaz ve sıvı kromatografi arasındaki fark nedir?

    Gaz ve sıvı kromatografi arasındaki temel farklar şunlardır: 1. Mobil Faz: Gaz kromatografisinde mobil faz gaz (genellikle helyum veya azot), sıvı kromatografisinde ise sıvı bir solventtir. 2. Analitik Örnekler: Gaz kromatografisi, uçucu ve termal olarak stabil bileşiklerin analizi için uygundur, sıvı kromatografisi ise daha düşük sıcaklıklarda çalıştığı için termal olarak kararsız veya hassas bileşikler için uygundur. 3. Kolon Türleri: Gaz kromatografisi, kılcal kolonlar kullanırken, sıvı kromatografisi katı parçacıklarla dolu uzun kolonlar kullanır. 4. Tespit Yöntemleri: Gaz kromatografisinde alev iyonizasyon dedektörü (FID) ve termal iletkenlik dedektörü (TCD) gibi dedektörler, sıvı kromatografisinde ise UV-Vis spektrofotometreleri ve kütle spektrometresi (MS) yaygın olarak kullanılır. 5. Uygulama Alanları: Gaz kromatografisi, petrokimya ve gıda endüstrilerinde uçucu bileşiklerin analizi için, sıvı kromatografisi ise farmasötikler ve biyoteknolojide karmaşık karışımların ayrılması için kullanılır.