Yapay zekadan makale özeti
- Kısa
- Ayrıntılı
- Bu video, Fırat Canaral ve Dicle ile Bengisu Kilisli tarafından sunulan kapsamlı bir hücre kültürü eğitim içeriğidir.
- Video, hücre kültürüne giriş yaparak konuyu dört ana başlık altında incelemektedir: hücre kültürü nedir, çeşitleri (süspansiyon kültür, yapışan kültür, kültür ve çeşitleri), temel teknikler (pasajlama, hücre dondurma, hücre çözme) ve kullanılan ekipmanlar (temel ekipmanlar ve güvenlik ekipmanları). İçerik, hücre kültürü yapmak isteyenler için temel bilgileri ve uygulamaları içermektedir.
- Videoda ayrıca hücre kültürünün tarihçesi, başarılı bir hücre kültürünün temel özellikleri, aseptik çalışma teknikleri ve laboratuvar güvenliği için gerekli ekipmanlar hakkında detaylı bilgiler verilmektedir. Tümör hücre kültürü ve örnek materyalin laboratuvar teslimi süreci de anlatılmaktadır.
- 00:29Hücre Kültürü Nedir?
- Hücre kültürü, bitki veya memelilerden izole edilen çeşitli hücre tiplerinin aminoasitler, vitaminler, inorganik tuzlar, serum ve glikoz gibi besin maddelerinin bulunduğu bir besiyeri ortamında uygun sıcaklık, nem ve karbondioksit ortamı altında insan vücudu koşullarının sağlanmasıdır.
- Hücre kültürü için insan, maymun, tavşan, kobay, fare gibi canlıların böbrek, akciğer, tümör, amniyon zarı gibi farklı doku ve organları kullanılır.
- Uygun koşullar altında petri kabı veya flask içerisinde bekletilen hücreler kabın çeperine tutunarak kapların yüzeylerini kaplayarak ürerler ve elde edilen yapı hücre kültürü adını alır.
- 02:04Hücre Kültürü Kullanımının Avantajları ve Dezavantajları
- Hücre kültürü yönteminin en önemli avantajlarından biri kontrol edilebilir olmasıdır; tüm çevre koşullarını kendimiz sağlayabileceğimiz bir hücre grubunu kontrol etmek ve üzerinde deneylerimizi sonuçlandırmak büyük avantaj sağlar.
- Tekrarlanabilir olması, karakterizasyonun kontrol edilebilir olması, ekonomik olmasının yanı sıra çalışmanın programlanabilir olması da önemli avantajlardan biridir.
- Dezavantajları arasında aseptik koşulları sağlamak zorunluluğu, deneylerin tekrarlanmasıyla maliyet sorunları, hücrelerin karakterizasyonunun değişmesi veya kromozomal anomalilerin oluşması gibi durumlar bulunmaktadır.
- 04:44Başarılı Bir Hücre Kültürünün Temel Özellikleri
- Başarılı bir hücre kültürü için temel cihazlarla donatılmış bir laboratuvar gereklidir; biyolojik güvenlik kabini, santrifüj, mikroskop, inkübatör ve 37 derece su banyosu gibi materyallerin sağlanması deneyin hassasiyetini ve kalitesini yürütmek için önemlidir.
- Steril tekniklerin uygulanması için biyolojik güvenlik kabini çalıştırılmalı, çalışma yüzeyleri temizlenmiş, malzemeler dekontamine edilmiş ve solüsyonlar 37 derece olmalıdır.
- Çalışacak kişi uygun şekilde giyinmiş olmalı ve aseptik çalışma gereklidir; şişelerin kapakları %70 lik etanol ile silinmeli, plastik kapaklar yüzeye ters konulmalı ve sağdan sola veya soldan sağa çalışılmalıdır.
- 09:18Hücre Kültürü Tarihçesi
- 1885 yılında Roux, tavuk embriyo hücrelerini kısa sürelerle tuz solüsyonda bekleterek deneyler yapmıştır.
- 1912'de Alexis Carroll bağ dokusu hücre kültürünü yapmış ve kalp kasının kasılabilme özelliğini 2-3 ay süreyle kültür ortamında gösterebilmiştir.
- 1970'lerde Gordon Sato ve ark, çok sayıdaki hücre tipi için gerekli besiyeri ve büyüme faktörünü tanımlamış, 1979'da Bottenstein ve Sato sinir hücreleri için serum içermeyen vesiyeri tanımlamıştır.
- 10:38Hücre Kültürü ve Çeşitleri
- Hücre kültürü dört başlık altında incelenebilir: süspansiyon kültür, yapışan kültür, pasajlama ve hücre dondurma.
- Primer kültür, uygun besin ve çevresel koşullarda hücrelerin tek tek hücre haline getirilmesi ve çoğaltılması işlemidir.
- Primer kültürler doğrudan dokudan elde edilir, dokunun özelliklerini taşır ve belirli yaşam süresine sahiptir.
- 11:40Süspansiyon ve Yapışan Kültür
- Süspansiyon kültür, süspansiyon kültürüne uyum sağlayabilen hücreler için uygundur, pasajlama daha kolaydır ve protein yemi elde etmek için kullanılır.
- Yapışan kültür için bağlanacak bir yüzeye ihtiyaç vardır, çoğu hücre tipi için uygundur ve histoloji amaçlı kullanılır.
- Yapışan kültürde hücreler bir yüzeye tutunduktan sonra tek sıra halinde tüm yüzeyi kaplayacak şekilde büyür, yeterli alan kalmadığında büyüme durur.
- 13:54Hücre Kültürü Temel Teknikleri
- Hücre kültüründe temel teknikler pasajlama, hücre dondurma ve hücre çözme olarak üç kısımda incelenebilir.
- Pasajlama, hücrelerin sıkışık konumda olduğu için yapılır ve üreme hızlarının düşmesini önlemek amacıyla yapılır.
- Hücrelerin dondurulması, hücre kültürünün uzun süre devam etmesi, kontaminasyon ve üreme hızının düşüşü gibi olumsuzluklara yol açabiliyor.
- 15:14Hücre Dondurma ve Çözme
- Dondurma prosedüründe su banyosu 37 dereceye ısıtılır, hücre besi ortamı ve serum bu sıcaklıkta tutulur.
- Hücre pelleti bir milim dondurma ortamı içerisinde süspanse edilir, kravial adı verilen tüplere konulur ve -80 derecede bir gece bekletilir.
- Hücrelerin çözülmesi, başka lablardan gönderilmiş veya üzerinde yapılan çalışmaya daha sonra devam edilmek üzere dondurulmuş olan hücre kültürleri için yapılır.
- 16:17Tümör Hücre Kültürü
- Tümör hücre kültürü, örnek materyalin laba teslimi, tümör hücre süspansiyonunun elde edilmesi ve hücrelerin sayılması aşamalarından oluşur.
- Tümör hücreleri önce küçük parçalara ayrılır, enzimlerle bir gece inkübasyon yapılır.
- Hücreler yıkanır, sayılıp canlılığının saptanması yapılır, ekilir ve 5-7 gün inkübe edilir.
- 17:15Hücre Kültüründe Temel Ekipmanlar
- Hücre kültüründe temel ekipmanlar otoklav, inverted mikroskop, buzdolabı ve hematosimetre olarak sıralanabilir.
- Otoklav, yüksek sıcaklıklarda buharlı ve basınçlı bir şekilde maddeleri ısıtıp sterilize etmeye dayanır, mikroorganizmaların protein yapı denetürü olduğundan dolayı onları öldürür.
- Inverted mikroskop, ışık kaynağını üstte, inceleyecek preparati altta bulunduran ve canlı inceleme için önemli bir mikroskop çeşididir.
- 18:21Buzdolabı ve Hematosimetre
- Buzdolabı, incelenmesi gecikecek ürünlerin canlılığını ve hücre sayılarını korumak için kullanılır, özellikle semih antitatif ve kantitatif kültürler için hayati önem taşır.
- Hematosimetre, hücre kültür laboratuvarlarında mecburi olan ve kültürdeki hücre sayısını saymak için kullanılan bir alettir.
- 18:50Hücre Kültüründe İlave Ekipmanlar
- İlave ekipmanlar arasında pipetler ve güvenlik elemanları bulunmaktadır.
- Pipetler, laboratuvarda sıvı kimyaların transferi için kullanılır ve belirli miktarlara yönelik olarak sınıflandırılmıştır.
- Güvenlik ekipmanları, üzerinde çalışılan örnekleri kendi vücudumuzdan ve üzerindeki kimyasallardan korumak için önlük, eldiven, maske, gözlük, bone, galoş ve maskeden oluşur.
- 22:35Hücre Kültürü Kabini ve Karbondioksit İnkübatör
- Hücre kültürü kabini birinci, ikinci ve üçüncü sınıf olmak üzere üç çeşittir; birinci sınıf iyi mikrobiyolojik teknikler kullanıldığında kullanıcıyı ve çevreyi korur, ancak kültürleri kontaminasyondan korumayı sağlamaz.
- Karbondioksit inkübatör, canlı materyalin uygun koşullarda üretilmesi ve muhafazası için kullanılan, homojen ve sabit sıcaklıkta (7-60°C) karbondioksit ve nemi ayarlayabilen, kendi kendine sterilize olabilen hava geçirmez laboratuvar cihazıdır.
- 23:47Su Banyosu ve Santrifüj
- Su banyosu, numunenin doğrudan ateşe maruz bırakılmak istenmediği durumda yavaş ve sabit sıcaklıkta ısıtılmasını veya önceden belirlenmiş bir süre tutulmasını sağlar.
- Santrifüj, durağan eksenli dairesel dönme hareketi meydana getiren bir alettir ve merkezkaç kuvvetiyle yerçekimi ivmesinden faydalanarak ağırlıkları farklı olan maddelerin ayrımında kullanılır.
- Santrifüj işlemiyle sıvı ortam içerisindeki partiküllerin yoğunlukları farklı iki sıvının birbirinden ayrılması sağlanır.
- 25:01İlave Ekipmanlar
- pH metre, asitlik-bazlık derecesini ölçen bir araçtır.
- Konfokal mikroskop, lazer taramalı konfokal mikroskop olarak da bilinir ve araştırmacılara yüksek ışık mikroskobu çözünürlüğü ile hücre altı yapılar ve fonksiyonları temiz bir şekilde görüntülenmesini sağlar.
- Akım sitometri, hücrelerin ve biyolojik partiküllerin fiziksel ve kimyasal özelliklerinin ölçülmesi için kullanılır; akım sitometre iki ise hücrelerin özelliklerinin bir sıvı içerisinde akarken ölçülmesini sağlar.
- 26:43Su Aritma Cihazı
- Su arıtma cihazı, saf su üretmek üzere laboratuvar uygulamalarında kullanılan bir cihazdır.
- Buharlaşmayı takip eden yoğunlaşma işlemiyle su içindeki tuz, çeşitli metaller ve benzeri maddelerden arındırılarak saflaştırılır.
- Distile su cihazlarının çalışma prensibi, belli bir akış hızı ile ürüne gelen suyun kaynatılıp yoğunlaştırılması sonrasında damıtılarak saf su haline getirilmesine dayanır.