TYT Biyoloji'nin en zor konusu hakkında farklı görüşler bulunmaktadır. Bazı kaynaklar, TYT Biyoloji'nin en zor konusunun hücre biyolojisi olduğunu belirtmektedir. Diğer bir görüşe göre ise TYT Biyoloji'de en zor konular arasında kalıtım yer almaktadır. Ayrıca, protein sentezi, ekoloji, solunum sistemi ve dolaşım sistemi de zor konular arasında sayılmaktadır. Biyolojinin zor olup olmadığı kişisel algılara ve öğrenme stillerine bağlı olarak değişebilir.