• Buradasın

    HPLC analizinde pik seçme nasıl yapılır?

    Yazeka

    Arama sonuçlarına göre oluşturuldu

    HPLC analizinde pik seçme işlemi, aşağıdaki adımlarla gerçekleştirilir:
    1. Kromatogramın İncelenmesi: Kromatogramda pikler, dedektör sinyalinin zamana karşı grafiğinde görülür 3. Piklerin x ekseninde alıkonma zamanı, y ekseninde ise dedektör sinyali yer alır 3.
    2. Piklerin Tanımlanması: Tek bir bileşene ait olduğu kanıtlanması gereken ilgili piklerin tanımlanması gerekir 5. Bu, kalma sürelerinin kıyaslanması veya bilinmeyen piklere ait bileşenlerin kolondan geçtikten sonra toplanıp spektroskopi, elementel analiz, termal analiz gibi tekniklerle tanımlanmasıyla yapılabilir 5.
    3. Pik Saflığının Kontrolü: Pik saflığının konfirme edilmesi için birden fazla seri bağlı dedektör, en az iki dalga boyunda ölçüm yapabilen absorbans dedektörü veya Photodiode Array (PDA) dedektörleri kullanılabilir 5.
    HPLC analizinde pik seçme ve tanımlama süreçleri, analize özgü dedektör ve kolon seçimi gibi faktörlere bağlıdır 3.
    5 kaynaktan alınan bilgiyle göre:

    Konuyla ilgili materyaller

    HPLC kolon çeşitleri nelerdir?

    HPLC (Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi) kolon çeşitleri şu şekilde sınıflandırılabilir: 1. Normal Faz HPLC: Polar (sulu) faz kullanılarak hidrofilik bileşenlerin ayrıldığı kolon türüdür. 2. Ters Faz HPLC (RP-HPLC): En yaygın kullanılan teknik olup, apolar bileşenler hidrofobik kolon içinde ayrıştırılır. 3. İyon Değişim HPLC: Yüklü bileşikleri ayırmak için kullanılır, genellikle protein ve amino asit analizlerinde tercih edilir. 4. Büyüklük Dışlama HPLC: Molekül boyutuna göre ayrım yapar, polimer ve protein analizlerinde kullanılır. 5. Hidrofilik Etkileşim Kromatografisi (HILIC): Normal veya ters faz analizi için uygun olmayan bileşikler için kullanılır.

    HPLC FLD nasıl çalışır?

    HPLC-FLD (Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi-Floresans Dedektörü), analitlerin floresan özelliklerini tespit ederek çalışır. Çalışma prensibi: 1. Numune Enjeksiyonu: Numune, hareketli faz ile birlikte kolona enjekte edilir. 2. Ayrışma: Karışımdaki bileşenler, kimyasal ve fiziksel özelliklerine göre farklı hızlarda hareket ederek ayrışır. 3. Dedektör Algılama: Floresans dedektörü (FLD), analit bir florofor içeriyorsa veya floresan olarak türevlendirilebilmişse, birden çok dalga boyu çiftini aynı anda algılayarak bileşenleri tespit eder. 4. Veri Analizi: Tespit edilen bileşenler, kromatogram adı verilen grafikle gösterilir ve çıkan veriler analiz edilerek bileşenlerin miktarları belirlenir. FLD dedektörünün hassasiyet seviyesi, UV-VIS dedektörlerinden üç ila altı kat daha yüksektir.