Marvel's Spider-Man 2 oyununda yer alan bazı kötü karakterler şunlardır: 1. Venom: Eddie Brock'un simbiyotla birleşmesi sonucu oluşan tehlikeli bir düşman. 2. Kraven the Hunter: Örümcek Adam'ı avlamak için New York'a gelen acımasız bir avcı. 3. Electro: Elektrik enerjisini kontrol edebilen süper kötü Max Dillon. 4. Sandman: Kum tanelerini kontrol edebilen ve vücudunu kuma dönüştürebilen kötü adam Flint Marko. 5. Rhino: Aleksei Sytsevich'in gergedan derisine benzer zırhı sayesinde neredeyse durdurulamaz olan süper kötü. 6. Kertenkele (Lizard): Curt Connors'un sürüngen forma dönüşen genetikçi versiyonu. 7. Mysterio: Özel efekt sihirbazı ve dublör olan kötü karakter.