Bir Zamanlar İstanbul dizisi, birebir gerçek bir olaya dayanmamaktadır. Dizi, 1990'lı yılların İstanbul'unda geçen ve toplumun adalet arayışını yansıtan kurgusal bir öyküye sahiptir. Dizinin merkezinde, İstanbul Üniversitesi Edebiyat Fakültesi’nde okuyan ve öğretmen olmayı hedefleyen Ali karakterinin hikayesi yer almaktadır. Dizi, aynı zamanda Seher karakterine de odaklanmaktadır. Dizinin senaryosu, Mehmet Bozdağ, Birol Tezcan ve A. Kadir İlter tarafından yazılmıştır.