TYT'de en zor biyoloji sorusu, kişisel algılara ve öğrenme stillerine bağlı olarak değişebilir. Ancak, biyolojinin TYT'de en zor konuları arasında hücre biyolojisi ve genetik yer alır. Hücre biyolojisi, hücre yapıları, işlevleri ve genetik materyalin anlaşılması gereken karmaşık bir konudur. Genetik ise DNA yapısı, gen ifadesi ve genomikleri içeren, yüksek düzeyde ezberleme gerektiren bir alandır. Ayrıca, bitki biyolojisi ve hayvan fizyolojisi de ayrıntılı bilgi gerektiren ve ezberlemeyi zorlaştıran konular arasında sayılır. Soruların zorluk seviyeleri, kolay, orta ve zor olarak sınıflandırılabilir; kolay sorular temel bilgileri ölçerken, zor sorular derinlemesine bilgi ve analiz gerektirir.